生物透射（掃描）電鏡固定液

更新時間：2024-09-26

簡要描述：

生物透射（掃描）電鏡固定液
生物透射電鏡服務以及生物樣品掃描電鏡都需要光學透鏡的焦點是固定的，而電子透鏡的焦點可以被調(diào)節(jié)，因此電子顯微鏡不像光學顯微鏡那樣有可以移動的透鏡系統(tǒng)。現(xiàn)代電子顯微鏡大多采用電磁透鏡，由很穩(wěn)定的直流勵磁電流通過帶極靴的線圈產(chǎn)生的強磁場使電子聚焦。

生物透射（掃描）電鏡固定液

生物透射電鏡服務以及生物樣品掃描電鏡都需要光學透鏡的焦點是固定的，而電子透鏡的焦點可以被調(diào)節(jié)，因此電子顯微鏡不像光學顯微鏡那樣有可以移動的透鏡系統(tǒng)?，F(xiàn)代電子顯微鏡大多采用電磁透鏡，由很穩(wěn)定的直流勵磁電流通過帶極靴的線圈產(chǎn)生的強磁場使電子聚焦。電子源是一個釋放自由電子的陰極，柵極，一個環(huán)狀加速電子的陽極構成的。由于光學顯微鏡分辨率的限制，蟲體表面細節(jié)很難在光鏡下觀察清楚，給線蟲分類帶來了較大困難。

　　電鏡技術包含掃描電鏡(scanning electron microscopy,SEM)以及透射電鏡(transmission electron microscope，TEM)。掃描電子顯微鏡,簡稱為掃描電鏡,是用細聚焦的電子束轟擊樣品表面,通過電子與樣品相互作用產(chǎn)生的二次電子、背散射電子等對樣品表面或斷口形貌進行觀察和分析。SEM已廣泛應用于材料、冶金、礦物、生物學等領域。透射電鏡:是以波長極短的電子束作為照明源,用電磁透鏡聚焦成像的一種具有高分辨本領、高放大倍數(shù)的電子光學儀器,主要應用于物質(zhì)內(nèi)部的超微結構觀察。

　　樣品掃描電鏡透射電鏡固定液介紹：

　　固定的目的是盡可能使細胞中的各種細胞器以及大分子結構保持生活狀態(tài)，并且牢固地固定在它們原來所在的位置上。固定的方法有物理的和化學的兩大類。物理的方法系采用冰凍、干燥等手段來保持細胞結構；化學的方法是用一定的化學試劑來固定細胞結構?，F(xiàn)通常使用化學方法對組織或細胞進行固定。

　　生物透射（掃描）電鏡固定液是常用固定劑：

　　1、是一種強氧化劑，與氮原子有較強的親和力，因而對于細胞結構中的蛋白質(zhì)成分有良好的固定作用。它還能與不飽和脂肪酸反應使脂肪得以固定。此外，還能固定脂蛋白，使生物膜結構的主要成分磷脂蛋白穩(wěn)定。它還能與變性DNA以及核蛋白反應，但不能固定天然DNA、RNA及糖原。固定劑有強烈的電子染色作用，用它固定的樣品圖象反差較好。固定的時間一般為1-2小時。

　　2．戊二醛(glutaraldehyde

　　C5H8O2)，戊二醛的優(yōu)點是對糖原、糖蛋白、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和細胞基質(zhì)等有較好的固定作用，對組織和細胞的穿透力比強，還能保存某些酶的活力，長時間的固定(幾周甚至1～2個月)不會使組織變脆。缺點是不能保存脂肪，沒有電子染色作用，對細胞膜的顯示較差。

　　組織塊固定常規(guī)采用戊二醛—雙重固定法。分預固定和后固定，中間用磷酸緩沖液漂洗。前固定用2.5%戊二醛固定2小時以上、后固定用1%固定液固定1～2小時，pH7.3～7.4。

　　固定完畢，用緩沖液漂洗20分鐘后進行脫水。

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