最近中文字幕在线资源,粗一硬一长一进一爽一A级,久久影院看电影的网站推荐,性色AV浪潮AV蜜桃AV

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 熒光定量Q-PCR檢測(cè)知識(shí)“大攻略”!
熒光定量Q-PCR檢測(cè)知識(shí)“大攻略”!
更新時(shí)間:2019-03-18   點(diǎn)擊次數(shù):1251次
   熒光定量Q-PCR檢測(cè)知識(shí)“大攻略”!
  熒光定量Q-PCR檢測(cè)的理論依據(jù)是什通過(guò)特定的待擴(kuò)增基因片段起始含量越大,則指數(shù)擴(kuò)增過(guò)程越短,當(dāng)擴(kuò)增速率趨于穩(wěn)定后,則無(wú)論原來(lái)樣品中起始模板含量多少,終擴(kuò)增片段的含量通常是一樣的。
  理想的擴(kuò)增結(jié)果:Y=X×2n;
  其中Y代表擴(kuò)增產(chǎn)物量,X代表PCR反應(yīng)體中的原始模板數(shù)n為擴(kuò)增次數(shù);理論上PCR擴(kuò)增效率為100%,PCR產(chǎn)物隨著循環(huán)的進(jìn)行成指數(shù)增長(zhǎng),但實(shí)際上:DNA的每一次復(fù)制都不*,即每一次擴(kuò)增中,模板不是呈2的倍增長(zhǎng);實(shí)際應(yīng)為:Y=X(1+E)n,其中E代表擴(kuò)增效率:E=參與復(fù)制的模板/總模板,通常E≤1,E在整個(gè)PCR擴(kuò)增過(guò)程中不是固定不變的。通常X在1-105拷貝、循環(huán)次數(shù)n≤30時(shí),E相對(duì)穩(wěn)定,原始模板以相對(duì)固定的指數(shù)形式增加,適合定量分析,這也就是所謂的指數(shù)期;隨著循環(huán)次數(shù)n的增加(>30次),E值逐漸減少,Y呈非固定的指數(shù)形式增加,后進(jìn)入平臺(tái)期。
  熒光定量Q-PCR檢測(cè)的理論模式:
  PCR是對(duì)原始待測(cè)模板核酸的一個(gè)擴(kuò)增過(guò)程,任何干擾PCR指數(shù)擴(kuò)增的因素都會(huì)影響擴(kuò)增產(chǎn)物的量,使得PCR擴(kuò)增終產(chǎn)物的數(shù)量與原始模板數(shù)量之間沒(méi)有一個(gè)固定的比例關(guān)系,通過(guò)檢測(cè)擴(kuò)增終產(chǎn)物很難對(duì)原始模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量。
  PCR擴(kuò)增通式:
  1.Tn=T0(1+E)n;
     2.Tn=Tn-1(1+E)n。
  注:[0其中E表示擴(kuò)增效率,n為循環(huán)數(shù),Tn表示在n個(gè)周期后PCR產(chǎn)物的數(shù)量,Tn-1表示在n-1個(gè)周期后PCR產(chǎn)物的數(shù)量,T0為原始模板數(shù)量。設(shè)定PCR到達(dá)指數(shù)擴(kuò)增期時(shí),產(chǎn)生一定的熒光(熒光依賴(lài)于某一循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物的總量,即特定的拷貝數(shù)K,為常數(shù),大約在1010左右)高于背景為儀器所識(shí)別,此時(shí)的循環(huán)數(shù)為CP,也就是K=T0(1+E)CP,取對(duì)數(shù)即:
  lg K=lg T0+CP*lg(1+E);
  CP=-1/lg(1+E)*lg T0+lgk/lg(1+E)。
  由于對(duì)一特定的PCR而言,E與K均為常數(shù),故上式為循環(huán)數(shù)(CP)對(duì)原始模板拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)(lg T0)一次方程,其標(biāo)準(zhǔn)形式y(tǒng)=kx+b,該直線(xiàn)的斜率為-1/lg(1+E),在橫坐標(biāo)上的截距為lgk/lg(1+E),也是熒光定量PCR所謂的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
  根據(jù)PCR擴(kuò)增過(guò)程中是否加入某種標(biāo)記物、標(biāo)記物的種類(lèi)以及后檢測(cè)的信號(hào)的不同可分為四種類(lèi)型:
  直接定量檢測(cè)法;同位素標(biāo)記定量;酶標(biāo)記定量檢測(cè)法;熒光定量Q-PCR技術(shù)。
  熒光定量PCR主要原理發(fā)射波長(zhǎng)與受體熒光染料光染料吸收供體熒光傳遞的能量而激發(fā)出另一波長(zhǎng)的熒光,同時(shí)將供體熒光淬滅。
毓秀生物科技(上海)有限公司

毓秀生物科技(上海)有限公司

工廠地址:上海市閔行區(qū)江月路999號(hào)12號(hào)樓302室

毓秀生物科技(上海)有限公司版權(quán)所有  備案號(hào):滬ICP備19003469號(hào)-1  總訪問(wèn)量:203716  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)  管理登陸

亚洲乱亚洲乱妇在线观看| 亚洲熟女一区二区三区| 国产人妻精品一区二区三区不卡 | 97久久久久人妻精品区一| 97久久国产亚洲精品超碰热| 69久久久久精品9999不卡片| 精品久久久久久无码中文野结衣| 久久久久99精品成人片三人毛片| 黑人巨大三根一起进| 极致凌虐被迫高潮SM在线观看| 99久久久国产精品免费| 亚洲综合伊人无码久久日日| 亚洲AV永久无码精品一百度影院| 亚洲精品一区二区三区麻豆| 亚洲色大成网站WWW久久九九| 夜夜精品无码一区二区三区| 国精品人妻无码一区二区三区牛牛| 国产乱码精品一区二区三区久久| 啊灬啊别停灬用力啊爷小说| 麻豆国产AV丝袜白领传媒| 民工把我奶头掏出来了怎么办| 久久久99精品免费观看| 暴虐SM灌浣肠调教| 97人妻天天爽夜夜爽二区| 久久久久久九九99精品| 亚洲欧美乱综合图片区小说区 | 善良的女朋友的闺蜜4| 丰满肥臀大屁股熟妇激情视频| 爆乳熟妇一区二区三区| 男男做爰猛烈叫床视频GV| 小雪你的奶好大把腿张开| FREE另类老女人HD| 男人添女人囗交做爰视频| 无码一区二区三区| 高潮又爽又无遮挡又免费| 欧洲熟妇色XXXX欧美老妇软件| 久草视频在线观看| 亚洲AV永久无码精品天堂D2| 国产午夜无码精品免费看性色 | 人妻偷人VA精品国产旡码| 精品国产日韩欧美一区二区三区|